目前“新型冠狀病毒肺炎”已在全球范圍內爆發,全球累計確診已超過300萬人口,作為“新型冠狀病毒”檢測金標準的核酸檢測試劑盒供不應求;試劑盒中用于檢測樣本前處理的重要組分,蛋白酶K更是“一K難求”。
圖1 蛋白酶K三維結構
蛋白酶K的應用
蛋白酶K在體外診斷、藥物加工等生物醫藥領域有著不可替代的重要作用。
在核酸提取檢測中的應用:DNA通常纏繞在由組蛋白和其他非組蛋白形成的染色體上,很難釋放。蛋白酶K可降解與核酸緊密結合的組蛋白,將DNA與蛋白質分離,使DNA更好的被提純;另外,蛋白酶K可降解RNA水解酶活性(Rnase),抑制Rnase水解模板RNA,在RNA的提取和檢測過程中起到不可或缺的作用。
圖2 蛋白酶K關鍵催化位點
在原位雜交中的應用:蛋白酶K通常用來消化靶標DNA周圍的蛋白質,以便于檢測探針的穿透,提高檢測的敏感性。但是蛋白酶K的濃度和消化時間都會影響雜交效果。濃度過高或消化時間過長,都會破壞細胞結構,出現細胞核消失及脫片等現象,影響核酸的結合。
在非蛋白組分提取中的應用:蛋白酶K可降解蛋白質類雜質,更好的將目標組分和來自生物樣本中的蛋白質進行分離,提高產物的純度和生產效率,還可以降解內毒素等蛋白質類有害成分,提高產品安全性。
長期以來,我國無法生產醫藥級別的蛋白酶K,下游產業嚴重依賴進口。武漢瀚海新酶生物科技有限公司是武漢光谷“3551光谷人才計劃”企業,是一家專業從事特種酶的研發、生產、應用和技術服務的高新技術類企業。其核心技術團隊由海外留學人員及國內酶工程領域的一流專家組成,建立了酶家族結構功能關系解析與分子理性設計等三大技術平臺,在酶工程技術上實現了關鍵性突破,代表國內酶工程的一流技術。
圖3 對異硫氰酸胍的耐受性
蛋白酶K生產工藝優化
瀚海新酶通過生物信息學分析、分子改造等技術手段成功篩選到一株具有較高有機溶劑耐受性的蛋白酶K突變體;運用了上海喬楓噴霧冷凍及真空攪拌等設備優化了蛋白酶K的生產工藝,提升3倍生產效率,實現了蛋白酶K千克級生產,使其成為國內較大的蛋白酶K生產商,相信蛋白酶K的及時供應,能夠生產更多的核酸檢測試劑盒,為國內外的朋友們提供更多的幫助,讓我們并肩作戰,共同戰勝新冠肺炎,早日回歸正常的生活!
圖4 真空攪拌三維立體圖
上海喬楓致力于為健康用酶、醫療用酶、生物酶提供新的生產工藝。
研究開發了噴霧冷凍技術,結合了噴霧干燥機和凍干機的優勢,比凍干機的產能提高3倍以上,為企業帶來巨大利潤。
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上海喬楓公司簡介
上海喬楓實業有限公司,成立于2012年,是專業從事粉體干燥設備的研發、生產、銷售和售后于一體的綜合性公司,本公司致力于為新能源材料、精細化工、生物制藥以及食品工程等領域提供全套解決方案的整線交鑰匙工程企業。
公司成立了以上海交通大學和華東理工大學為主的核心研發團隊,同時與浙江大學機械工程部等眾多科研單位進行常年合作,取得了多項核心技術的突破。發明了噴霧冷凍技術,結合凍干機和噴霧干燥機的優勢,比凍干機提升了3倍生產效率;運用DACTS 3干風原理,在國內首次實現35℃的低溫噴霧干燥,為熱敏性物料的干燥提供了新工藝,現已廣泛應用到生物制藥和植物提取等領域。同時上海喬楓研發了超細粉末噴霧干燥機,可以生產300納米-20微米的超細粉末粒子,填補了國內技術空白,為有超細粉末需求的客戶提供了良好的的解決方案。